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关于自动进样器在HPLC分析中的应用

2017-03-27 [517]
自动进样器在生化分析仪器,色谱分析仪器中有着广泛应用,它的运行可靠性和性直接影响着分析结果。液相色谱系统大多使用自动进样器引入样品,正确使用自动进样器是保证液相色谱系统分离度的基本条件,用自动进样器注入适当体积的标准样品可为峰高和峰面积的测量提供小于1%的标准偏差。  
对于液相色谱而言,无论是手动进样器或是自动进样器都是用六通阀进样的,只是自动进样的较手动进样器的死体积较大,多了计量泵和一部分联接管线。自动进样器可以减少体力劳动,增加样品处理量,提高日常工作精度。  
现在的色谱实验室,大都使用六通进样阀或自动进样器。进样装置要求:密封性好,死体积小,重复性好,保证中心进样,进样时对色谱系统的压力、流量影响小。HPLC分析进样方式可分为:隔膜进样、停流进样、阀进样、自动进样。  
1.隔膜进样。  
用微量注射器将样品注入专门设计的与色谱柱相连的进样头内,可把样品直接送到柱头填充床的中心,死体积几乎等于零,可以获得zui佳的柱效,且价格便宜,操作方便。但不能在高压下使用(如10MPA以上);此外隔膜容易吸附样品产生记忆效应,使进样重复性只能达到1~2%;加之能碉各种溶剂的橡皮不易找到,常规分析使用受到限制。  
2.停流进样。  
可避免在高压下进样。但在HPLC中由于隔膜的污染,停泵或重新启动时往往会出现“鬼峰”;另一缺点是保留时间不准。在以峰的始末信号控制馏分收集的制备色谱中,效果较好。  
3.阀进样。  
一般HPLC分析常用自动进样器六通进样阀,其关键部件由圆形密封垫子(转子)和固定底座(定子)组成。由于阀接头和连接管死体积在存在,柱效率低于隔膜进样(约下降5~10%左右),但耐高压(35~40MPA),进样量准确,重复性好(0.5%),操作方便。